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霍夫曼調(diào)制對比已經(jīng)確立了自己作為觀察未染色，低對比度生物標(biāo)本的標(biāo)準(zhǔn)。其創(chuàng)新的技術(shù)實施許可顯著簡單的處理和更大的靈活 性。在現(xiàn)代倒置顯微鏡的光路調(diào)制器的集成允許使用范圍廣泛的明場或載物臺的物鏡，而不是一小部分的特殊物鏡。現(xiàn)在，對比度可以修改和優(yōu)化的單獨使用自 由接近調(diào)制器。

在光路徑中的特殊成分
在光路中的至少兩個特殊的部件所必 需的調(diào)節(jié)對比度的照明。以使斜光的狹縫板放置在聚光鏡的前焦平面。其次，調(diào)制器被放置在物鏡的后焦平面。調(diào)制器包含具有不同的光密度三個指定區(qū)域：一個透明區(qū)，一個具有15％的光的權(quán)限和一個用1％的光的權(quán)限。光通過調(diào)制器是通過定義所謂的調(diào)制。

調(diào)節(jié)對比度
調(diào)節(jié)對比度是對比度增強的寬視場顯微鏡可以轉(zhuǎn)換在未染色標(biāo)本和活 細胞光學(xué)梯度或斜坡入不同的光強度的方法。它是在1975年發(fā)明了由羅伯特·霍夫曼和采用狹縫板，使斜照明和調(diào)制器，用于光強度調(diào)制。由于樣品的三維外觀，在醫(yī)學(xué)和生命科學(xué)的調(diào)節(jié)對比度的主要應(yīng)用是類似ICSI和顯微技術(shù)（胞漿內(nèi)單精 子注射）在IVF克 隆和原核注射轉(zhuǎn)基 因。
除了上述組分含有偏振片的第 二狹縫通?？梢栽诨瑒影逯姓业健Ｔ谂c位于顯微鏡的聚光鏡的頂部，另一個偏振片組合，該偏振片可以用于控制有 效狹縫開口（通過打開90°（暗）的位置），并啟用緩 解的效果。需要注意的是檢體未允許的雙折射塑料或玻璃容器雇傭的偏振器之間的位置。然而，偏振片不是調(diào)制對比度的先決條件。

IMC提供了更多的自 由
在綜合調(diào)制對比度的情況下（IMC）的調(diào)制器的物鏡以外的焦平面共軛到所述聚光鏡（中間光瞳）的光束路徑（圖4）結(jié)合起來。調(diào)制器被安裝在其上分別插入在支架上一側(cè)的瞳孔間接口滑塊。因此，它們是自 由訪問，并允許用戶根據(jù)需要很容易地調(diào)節(jié)對比度。 除此之外，
調(diào)制相差梯度轉(zhuǎn)換成亮度漸變
細胞的許多部件導(dǎo)致通過固有特性的改變透射光的相位。這些性能可能是斜率和特定結(jié)構(gòu)的陡度，獲得修改折射率變化率或僅僅改變在給定結(jié)構(gòu)的厚度的結(jié)構(gòu)。由于這些性質(zhì)（如單元厚度）通常在一定面積逐漸變化（而不是立即改變），光的相位的過這方面的變化也發(fā)生逐漸導(dǎo)致相位梯度。相梯度將衍射入射光引起的光的偏轉(zhuǎn)角的變化。

由于所采用的調(diào)制相反的偏斜照明，在偏轉(zhuǎn)的角度的變化可能大大受到影響，光將通過調(diào)制器在不同的區(qū)域相比，非偏轉(zhuǎn)的光。在小區(qū)（s）表示，都或多或少均勻的斜率，陡度，厚度等的圈所產(chǎn)生的圖像的區(qū)域?qū)@示為灰色。同樣情況也適用于圖象的背景，因為光通過這些同質(zhì)區(qū)域不會經(jīng)歷相移由于在檢體相梯度和幾乎不被偏轉(zhuǎn)。（奧林巴斯顯微鏡）
在一個調(diào)制對比度系統(tǒng)的非偏轉(zhuǎn)的光通過在用15％的光的權(quán)限的調(diào)制器的面積，導(dǎo)致灰的顏色為細胞（S）和背景的均質(zhì)區(qū)域。當(dāng)光通過引起的相移（例如改變細胞膜的斜率）的試樣的區(qū)域中，光被偏轉(zhuǎn)或者黑暗（1％許可）或調(diào)制器的透明（100％許可）的區(qū)域。作為試件是傾斜地照亮，該圖像將出現(xiàn)從梯度從梯度的另一側(cè)（在光被偏轉(zhuǎn)到區(qū)域與（其中光被偏轉(zhuǎn)到區(qū)域用1％許可）和亮的一側(cè)較深100％的許可）。