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一.背景介紹

　　葉綠素銅，是一種人工著色劑，為脂溶性化合物，在食品工業(yè)應(yīng)用非常廣泛，常見于稀奶油、糖果、焙烤食品等，至大使用量一般不得超過0.5g/kg。然而有些不法商家為了牟取暴利，會(huì)在葵花籽油或者大豆油中添加葉綠素銅，使其外觀呈現(xiàn)黃綠色，冒充橄欖油進(jìn)行銷售。

　　目前檢測(cè)橄欖油中葉綠素銅的方法，主要有分光光度法、液相色譜法和液相色譜串聯(lián)質(zhì)法。其中，液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法相比其他方法，不僅靈敏度高，而且能夠更加準(zhǔn)確地進(jìn)行定性定量分析，所以通常被作為橄欖油中是否含有葉綠素銅的至終判定方法。然而，該法在上機(jī)前，需要使用固相萃取小柱來去除橄欖油當(dāng)中油脂的干擾，前處理操作不僅繁瑣費(fèi)時(shí)，而且容易給分析結(jié)果導(dǎo)入誤差?！　?/p>

　二.Nexera UC 特色系統(tǒng)  SFC-LC-MS/MS在線前處理二維系統(tǒng)

　　將島津超臨界流體色譜SFC和反相液相色譜組合，搭建了一套二維柱切換SFC-LC系統(tǒng)，并配備質(zhì)譜檢測(cè)器，實(shí)現(xiàn)了橄欖油中非添加葉綠素銅的快速自動(dòng)化檢測(cè)。使用該系統(tǒng)，無需對(duì)橄欖油進(jìn)行任何復(fù)雜前處理，只需用正相溶劑簡(jiǎn)單稀釋后就可以直接進(jìn)樣分析。

　　簡(jiǎn)單:使用正己烷將植物油約10倍稀釋后，即可直接進(jìn)樣分析;

　　快速:整體分析時(shí)間從原來的數(shù)小時(shí)縮短至20min以內(nèi)

　　準(zhǔn)確·回收率接近100%，精密度好，準(zhǔn)確度高;

　　環(huán)保:使用超臨界CO2流體替代有機(jī)溶劑，不僅節(jié)能環(huán)保，且運(yùn)行成本低。

　三.橄欖油中葉綠素銅的快速測(cè)定解決方案

　　3.1 分析條件

　　液相條件:

　　SFC凈化柱:Shim-pack UC-X Diol4.6x250 mm,5 um

　　反相分離柱:InertsilODS-P 2.1x 150mm,5um

　　SFC流動(dòng)相:SF-CO2/異丙醇=86/14

　　進(jìn)樣體積:20 uL

　　BPR溫度：40°C

　　前處理柱: Shim-pack VP-ODS 4.6x50mm,5 um

　　柱溫:40°C

　　反相流動(dòng)相:異丙醇

　　洗脫方式：梯度洗脫

　　質(zhì)譜條件:

　　離子源:APCI(-)

　　接口電壓:-3.5 kV

　　霧化氣: 氮?dú)? L/min

　　干燥氣: 氮?dú)?L/min

　　DL管溫度: 250°C

　　接口溫度:350°C

　　加熱模塊溫度: 300°C

　　掃描模式:多反應(yīng)監(jiān)測(cè) (MRM)見下表

　　3.2 數(shù)據(jù)結(jié)果及分析

　　1）葉綠素銅色譜圖

　2）標(biāo)準(zhǔn)曲線呈現(xiàn)良好線性關(guān)系，檢出限為2ug/kg

　　3）橄欖油樣品葉綠素銅的保留時(shí)間和峰面積重復(fù)性結(jié)果良好 (n=6)

　　4）不同加標(biāo)濃度的樣品均得到接近100%的加標(biāo)回收率結(jié)果

　　5）實(shí)際樣品分析，橄欖油1未檢出，橄欖油2和3檢出葉綠素銅含量

　四.結(jié)論

　　采用SFC-LC-MS/MS在線前處理二維系統(tǒng)測(cè)定橄欖油中的葉綠素銅含量，不僅可以顯著縮短前處理時(shí)間，簡(jiǎn)化過程，減少由于傳統(tǒng)前處理方法帶來的損失，而且還可以有效減少有機(jī)溶劑的消耗，是一種綠色環(huán)保的檢測(cè)技術(shù)。

　　通過將超臨界流體色譜與反相液相色譜聯(lián)用，并配備APCI源的MS/MS檢測(cè)器，實(shí)現(xiàn)了橄欖油中葉綠素銅的快速檢出，可用于鑒別偽橄欖油。

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